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一、本質(zhì)不同
間接的酶標抗體是二抗,與待檢抗體結(jié)合;阻斷酶標抗體是一抗,與抗原結(jié)合。間接中底物降解的量與抗體量相等,阻斷底物降解量與抗體。
二、實驗結(jié)果不同
酶聯(lián)免疫吸附試驗:是酶免疫測定技術(shù)中應用zui廣的技術(shù),其基本方法是將已知的抗原或抗體吸附在固相載體 ( 聚苯乙烯微量反應板 ) 表面,使酶標記的抗原抗體反應在固相表面進行,用洗滌法將液相中的游離成分洗除,常用的ELISA法有雙抗體夾心法和間接法。
OD值不同是因為前后樣液的濃度不同,所以透光率也不一樣,但是前后的OD值都是表示同一種物質(zhì)在不同濃度時的OD值,只是相對在0.2-0.8范圍內(nèi)比較精確而已。
三、用途不同
ELISA更為簡便實用和標準化,從而使其成為zui廣泛應用的檢測方法之一,目前ELISA方法已被廣泛應用于多種細菌和病毒等疾病的診斷,在動物檢疫方面,ELISA在豬傳染性胃腸炎、牛副結(jié)核病、牛傳染性鼻氣管炎、豬偽狂犬病、藍舌病等的診斷中已為廣泛采用的標準方法。
用于標記的酶用于標記抗體或抗抗體的酶須具有下列特性:有高度的活性和敏感性;在室溫下穩(wěn)定;反應產(chǎn)物易于顯現(xiàn);能商品化生產(chǎn)。目前應用較多的有辣根過氧化物酶(HRP)、堿性磷酸酶、葡萄糖氧化酶等,其中以HRP應用zui廣。
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